Отправлено: 03.07.09 08:42. Заголовок: Бесплодие у кобелей (проверка спермы)

Кобеля считают бесплодным в том случае, если после вязки со здоровыми суками он не оставляет потомства, или если он вообще не может повязать суку.
Обычно заводчики обращаются к ветеринарному врачу по поводу бесплодия кобеля в том случае, если от него рождается меньше щенков, чем обычно для данной породы, или же его предшественники были более плодовитыми.

Прежде чем поставить диагноз бесплодия, ветеринар выясняет причину и назначает лечение. Он основывается на данных клинического осмотра и результатах дополнительных исследований, в числе которых обязателен анализ спермограммы и определение уровня содержания гормонов.

Клиницист должен собрать как можно больше информации об истории болезни животного, обращая основное внимание на заболевания или медикаментозные средства, которые могут вызвать временное или постоянное бесплодие.

Во внимание принимают также питание животного: недостаток цинка, селена, линолиевой кислоты, витамина А или избыток витамина D.

Заводчик должен сообщить врачу следующие сведения о производителе:

- Число полученных от него пометов, даты рождения и число щенков;
- Поведение во время вязки;
- Частота последних вязок;
- Дата последней плодотворной вязки;
- Дата последней вязки;
- Предыдущие результаты проверки спермы.

Клинический осмотр

Он включает общий осмотр (упитанность, заболевания, раны или травмы и т.п.), а также детальное обследование органов мочеполовой системы, которое включает осмотр полового члена, пальпацию тестикулов и ректальное исследование простаты.
Дополнительные исследования

Проверка спермы: спермограмма

Это основное исследование, которое поможет установить природу и причину бесплодия, по крайней мере, оно показывает, в каком направлении необходимо проводить дальнейшие обследования.

Спермограмма позволяет вывить следующее:

Аспермию – отсутствие спермы, несмотря на попытки эякуляции;

Азооспермию – отсутствие сперматозоидов в сперме;

Олигоспермию – ненормально сокращенное число спермиев;

Астенозооспермию – очень слабая подвижность сперматозоидов;

Тератозооспермию – ненормальные формы сперматозоидов в избыточном количестве.

В бланке спермограммы записывают следующие сведения:

Дата, номер образца, кличка кобеля, порода, дата рождения, объем собранной спермы, внешний вид спермы (консистенция, цвет, запах) и подвижность сперматозоидов (% подвижных); концентрация (% сперм./ммЗ); общее число сперматозоидов; % сперматозоидов окрашенных эозином-негрозином, % сперматозоидов с аномальной морфологией среди окрашенных (головка, тело, хвост, без головки);

Капля протоплазмы.
Техника забора спермы для анализа

Для забора спермы необходима искусственная каучуковая вагина с пластиковым колпачком, который не травмирует орган. Колпачок должен иметь градуировку, для того чтобы можно было немедленно определить объем собранной спермы. Для такого анализа необходимо иметь несколько вагин разного размера, чтобы правильно подобрать ее для кобеля, потому что размеры полового члена у кобелей разных пород сильно варьируют. Собранную сперму необходимо предохранить от охлаждения, поместив колпачок в теплую воду, а также от света, завернув собранный материал в непрозрачную бумагу. На самом деле все эти предосторожности излишни, если образец исследуют непосредственно после забора, но они оправданы, если дополнительные исследования придется провести спустя несколько часов.

Эякуляция достигается с помощью мастурбации пениса с помощью каучуковой вагины. После небольшого массажа, сопровождающегося движениями таза животного, пенис полностью выдвигается, и пещеристое тело (луковица) максимально увеличивается в объеме. В этот момент необходимо прекратить массаж, который может только нарушить эрекцию, и сильно сдавить вагину между большим и указательным пальцами позади пещеристого тела (луковицы).

Некоторым кобелям эта процедура доставляет удовольствие, и они даже имитируют фрикционные движения, как при обычной вязке. В этом случае лучше подстроить свои действия под кобеля и отвести вагину назад. Следует сохранять терпение. Эякуляция происходит в три фазы (уретральная – в мочевом канале, эпидимисная – в придатке яичка, и простатная – в простате). Уретральная порция эякулята выделяется сразу же, а для сбора всего эякулята потребуется около десяти минут.

Предосторожности и причины неудач

Моющие вещества, антисептики и вода убивают спермии, поэтому после дезинфекции оборудование необходимо тщательно сполоснуть чистой водой и не использовать его до тех пор, пока оно окончательно не высохнет. Для разделения трех разных фракций спермы используют три пробирки.

Присутствие суки при заборе спермы, особенно течной, во многих случаях облегчает задачу, но, как правило, присутствие ее не обязательно. Некоторые производители уже привыкли выполнять роль «донора» в питомнике или в банке спермы, с ними легко манипулировать. Другие же кобели могут вести себя робко или агрессивно (особенно это касается карликовых пород), что затрудняет работу с ними. Для того, чтобы завоевать их доверие, необходимо создать спокойную обстановку, во время процедуры должны присутствовать только владелец собаки, врач и ассистент, последним лучше не одевать белых халатов. Если собака все же нервничает, владелец может зажать ее голову между коленями так, чтобы она не видела врача с ассистентом и они могли спокойно манипулировать.

Результаты забора спермы

МАКРОСКОПИЧЕСКИЙ ОСМОТР

(Ветеринарный врач оценивает объем спермы, ее цвет и запах)

Объем

Собранную сперму необходимо сразу же исследовать под микроскопом, чтобы при сборе небольшого объема спермы (от 1 до 6 мл, в зависимости от породы) убедиться в том, что получена вся порция спермы, а не только первая фракция эякулята.

Внешний вид

Собранный образец спермы представляет собой жидкость молочного цвета. По внешнему виду спермы можно приблизительно судить о концентрации сперматозоидов в ней. Если она бесцветная, то их мало или же они вовсе отсутствуют. При интенсивном окрасе спермы можно предположить, что в ней много сперматозоидов. Желто-зеленоватый цвет обычно свидетельствует о присутствии в сперме гноя, а розоватый – крови.

Запах

Сперма кобеля не имеет запаха, за исключением тех случает, когда в ней присутствует моча или гной.

Микроскопическое обследование

Оно позволяет оценить подвижность, концентрацию и внешний вид сперматозоидов, а также включения других клеточных структур, таких как кровяные тельца или опухолевые клетки.

Качество и оплодотворяющая способность спермы зависит от этих факторов.

Выводы

Никогда не следует основываться только на данных спермограммы, необходимо принимать во внимание данные анамнеза и клинического осмотра. Например:

– После продолжительного периода сексуального отдыха первые эякуляты получаются плохого качества по причине перезревания в эпидидимисе (придатке яичка). Качество спермы восстанавливается после второй-третьей нормальной эякуляции.

– Качество эякулята у одного и того же животного может варьировать в течение года.

Для правильного заключения необходимо исследовать как минимум два анализа, взятых с интервалом два месяца.

Проведение других исследований

СПЕРМА

Спермокультура

Это исследование необходимо проводить после тщательной дезинфекции области живота и препуция. С помощью микроскопа выявляют присутствие аномальных элементов в сперме, в особенности кровяных клеток: красных и белых кровяных телец.

При анализе спермы можно также выявить бруцеллу канис и герпес-вирус собак.

Биохимический анализ семенной жидкости

Содержание щелочных фосфатов интересно, так каких секретирует исключительно эпидидимис (придаток яичка). Этот показатель свидетельствует о его правильном функционировании (N=5000–40000 UI).

Также важно определить ph спермы. Показатель ph в норме слегка кислый (N=6,2–2,6) и отклонения от нормы свидетельствуют о биохимических изменениях в семенной жидкости и чаще всего связаны с патологией простаты или везикулов.

Мазок из препуция

Это исследование проводится для двух показателей:

–диагоностика и контроль местных инфекций
–оценка гормональной активности.

Эхография семенников и простаты

На основании предыдущих анализов диагноз уже можно установить, но если есть на опухоль яичка, кисту простаты или воспаление, то выявить их можно с помощью эхографии, а также оценить размер нарушения.

Уровень гормонов

Бесплодие у самцов может быть связано с гормональным нарушением. Гормоны в организме отвечают за самые разные функции, поэтому проверка гормонов у собаки бесплодной необходима для выяснения причины бесплодия, при этом важно проверить не только половые гормоны, но и гормоны надпочечников и щитовидной железы.

Половые гормоны

Тестостерон - гормон необходиммый для поддержания либидо и проявления вторичных половых признаков. Он отвечает за секреторную активность клеток Лейдига (железистые клетки семенников).

Эстродиолемия – прогестеронемия. При недостаточной или избыточной секреции клеток Лейдига и Сертоли свидетельствует о дисфункции тканей этих органов.

Гормоны щитовидной железы

В некоторых случаях снижение либидо и реже тестикулярная атрофия или же бесплодие могут предшествовать классическим симптомам недостаточной функции щитовидной железы (например, алопесия – облысение). Именно поэтому в случае бесплодия необходимо проверить уровень не только половых гормонов у собаки, но гормонов щитовидной железы.

Кортизол

Изменения содержания кортизола в плазме крови оказывают влияние на репродуктивную функцию. Это может быть вызвано дисфункцией надпочечных желез или связано с чрезмерным и длительным лечением кортикоидами.

Именно поэтому рекомендуется у бесплодных кобелей проверить активность коркового вещества надпочечников.
Выводы

В результате всех многочисленных исследований, которые нередко занимают много времени и дорого стоят, ветеринарный врач может сделать вывод о причине бесплодия у кобеля.

В некоторых случаях положительные результаты приносит хирургическое вмешательство или терапевтическое лечение, однако в целом следует иметь в виду, что прогноз при бесплодии у кобелей чаще всего неблагоприятный, в отличие от сук.

Причины бесплодия у кобелей
Генетические причины

А) Крипторхизм
Б) Аномалии сексуального развития

Сопутствующие нарушения

А) Аномалия спермы, приводящая к бесплодию
Б) Патология тестикулов

1 Орхит и орхиэпидимит (воспаление яичка и простаты)
2 Мошоночная грыжа
3 Гранулема семенного канатика
4 Опухоли семенника
5 Гипоплазия (недоразвитие) семенника
6 Дегенеративная атрофия семенника

В) Патология простаты

1 Доброкачественная гиперплазия простаты
2 Простатит
3 Опухоль простаты

Г) Пролапс уретры

Д) Инфекционные заболевания
1 Бруцеллез
2 Микоплазмоз

Кристиан Дюмон, Сильвен Прижан, Филипп Мимуни
Перевод с французского Маргариты Смеловой

 Отправлено: 03.07.09 08:56. Заголовок: Современная концепци..

Современная концепция бесплодия кобелей


Чери Джонсон
Cheri Johnson, DVM, MS, Dipl. ACVIM (SAIM)Факультет клинических наук мелких домашних животных Ветеринарного колледжа при Мичиганском государственном университете (г. Ист-Лэнсинг, США)

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ
* Иногда удается достичь оплодотворения даже спермой невысокого качества, если осеменение проведено в оптимальный для суки срок.
* После травмы возможно восстановление функций тестикулов, если сохранены жизнеспособные сперматогонии, но на восстановление качества спермы может уйти от 3 до 12 месяцев.
* Очень маленькая величина тестикулов служит основанием для плохого прогноза в плане восстановления плодовитости кобеля.
* В случаях одностороннего орхита или опухоли тестикула удаление пораженной половой железы может обеспечить сохранение нормального тестикула


Нет точного определения тому, что следует понимать под бесплодием кобеля. Поэтому вполне очевидно: у владельца домашних животных, заводчика, занимающегося разведением чистопородных собак, и директора коммерческого питомника имеются разные возможности разведения и представления о плодовитости кобелей. Обычно собак приводят к ветеринарному врачу с подозрением на бесплодие, если те проявили нежелание или не смогли участвовать в вязке, а также когда сука после вязки не дала приплода. В последнем случае, как правило, остается неизвестным, что стало причиной бесплодия - отсутствие оплодотворения или последующая смерть эмбрионов, поскольку диагностику ранней беременности у сук обычно не проводят.
Конечно, для собак, которых активно используют для племенного разведения, применима рекомендация относительно необходимости оценивать плодовитость, когда после вязки частота наступления беременности/родов не превышает 75% (1) или когда после вязки кобеля с 3 разными суками у них не наступила беременность (2). При этом безрезультатность этих трех вязок или понижение частоты наступления беременности на 75% обнаруживается лишь спустя недели. Однако чем реже кобеля используют в качестве племенного производителя, тем больше времени проходит до того, как у него распознают наличие бесплодия. Оценка плодовитости кобеля по результатам 3 последовательных или 3 из 4 (75%) вязок не всегда достоверна, поскольку нельзя исключить, что у животного происходит прогрессирующее снижение этой функции за время проверки. Уменьшение количества щенков в пометах также может служить признаком бесплодия, но данный показатель малопригоден для кобелей, которых редко используют в племенных целях.


Анамнез
Плодовитость кобеля зависит от таких его характеристик, как половое влечение, способность к спариванию и качество спермы. Необходимо ответственно относиться к выбору партнерши, поскольку это также имеет важное значение для результативности вязки. Ситуация усложняется еще и тем, что кобелям и сукам редко предоставляют возможность спариваться самостоятельно. Время и частоту осеменения, тип используемой для этого спермы (свежая, охлажденная или замороженная) определяет владелец суки. Анамнестические данные позволяют оценить общее состояние здоровья кобеля, получить информацию о прививках, степени вероятности наличия у него инфекции Brucella canis, перенесенных им и другими собаками в том же питомнике заболеваниях, методах лечения, а также об уровне его физической активности - принимает ли собака участие в охоте или бегах.
Специально следует опросить владельца относительно либидо кобеля, в частности, проявляет ли он интерес к сукам, приходит ли в их присутствии в возбуждение и не предпринимает ли попыток сделать садку (Таблица 1).



Таблица 1. Причины слабого либидо

* Половая незрелость
* Старость
* Психологические/поведенческие:
1. При нахождении кобеля за пределами своей территории
2. Подчиненное положение по отношении к суке
3. Подчиненное положение по отношению к другому кобелю, который
4. находится рядом
* Отсутствие течки у суки
* Боль
* Метаболические/эндокринные болезни
* Действие лекарственных препаратов



Отвечают ли суки ему взаимностью? Совершает ли он после вспрыгивания на суку энергичные движения тазом и пытается ли ввести пенис в вульву суки? Обычно при оценке либидо трудно дифференцировать физические аспекты от психологических, или какие факторы связаны с сукой, и какие - с кобелем. Например, суки, у которых не наступила течка, не проявляют полной готовности к вязке. Аналогично этому некоторые кобели не вскакивают на сук, когда у них нет течки. Половой инстинкт понижается у старых собак. Неопытные и занимающие низкое иерархическое положение кобели могут испытывать испуг в присутствии доминирующей суки или оказавшись в непривычной обстановке. В нашей практике был случай, когда у кобеля временно снижалось либидо в результате изнеможения, возникавшего после продолжительного проявления повышенной активности. Физические аномалии у суки (в частности, наличие перегородки во влагалище) или у кобеля (ортопедические проблемы и др.) могут мешать нормальному течению садок и спариванию даже при сильном либидо. И наоборот, в таких ситуациях может возникать подозрение о слабом либидо у кобеля. Любые заболевания, сопровождающиеся болью, в том числе простатит, могут отрицательно сказываться на либидо кобеля и его способности к спариванию (Таблица 2).


Таблица 2. Заболевания, оказывающие влияние на способность к вязке

* Ортопедические
* Неврологические
* Болезни предстательной железы
* Болезни пениса
* Болезни препуция
* Аномалии влагалища, препятствующие спариванию

Происходит ли во время совокупления склещивание, или «замок», как его еще называют, - «страховка» природы для успешного проведения вязки, обусловленная физиологическими особенностями собак? Эякулят кобеля состоит из 3 фракций. Выделение первой из них, представляющей собой секрет предстательной железы, происходит в то время, когда кобель во время спаривания начинает совершать активные движения тазом. Эти движения обычно прекращаются в тот момент, когда начинается выделение второй, богатой сперматозоидами фракции (3). Эякуляция продолжается и в период нахождения собак в «замке» - в это время выделяется третья фракция (секрет предстательной железы). Хотя продолжительность нахождения кобеля и суки в «замке» не влияет на оплодотворение, факт возникновения замка после коитуса свидетельствует о том, что спаривание прошло успешно и во влагалище суки попало определенное количество эякулята. При отсутствии «замка» нет твердой уверенности в успешном проведении вязки и оплодотворении суки. Кобель, у которого в результате крайнего перевозбуждение эрекция наступила до введения пениса в половую щель суки, осуществить последнее не может, поскольку этому препятствуют увеличившиеся в размере луковицы пениса. В такой ситуации - некоторые заводчики собак называют ее «внешним замком» - после того, как кобель соскакивает с суки, склещивания не происходит. Эякуляция в этих обстоятельствах может происходить, но сперма необязательно попадет во влагалище.
Необходимо проанализировать данные о результатах ранее проводившихся вязок кобеля (частота наступления у повязанных им сук беременности /родов). Представляет интерес информация о том, наступала ли беременность у суки после вязок с другими кобелями до или после спаривания с этим кобелем. Сведения о частоте использования кобеля в племенных целях также очень важны. Например, ежедневная эякуляция может привести к значительному, но не обязательно клинически значимому снижению количества сперамтозоидов в эякуляте (см. ниже раздел «Оценка качества спермы»). Следует проанализировать также методы, которые использовались для определения времени проведения вязки, с тем, чтобы проверить, действительно ли осеменение суки произошло в оптимальный для оплодотворения период (Таблица 3). Две вязки вместо одной в оптимальный для оплодотворения период дают более высокую вероятность наступления беременности. Важен также метод осеменения (вязка или искусственное влагалищное, либо маточное осеменение) (4).

Таблица 3. Методы определения оптимального срока вязки

* Заблаговременно подберите место для спаривания.
* Проводите вязку через день, до окончания у суки периода охоты (течки).
* Проводите вязку через день при выявлении суки охоты (обычно на 10-12-й дни течки).
* Подтверждайте начало течки результатами цитологического исследования влагалищных мазков.
* Пользуйтесь эндоскопией влагалища для подтверждения начала течки и времени овуляции.
* На основании данных о концентрации прогестерона в сыворотке крови суки определите, когда активность лютеинизирующего гормона достигнет пика, - это время более всего подходит для вязки.
* Определяйте концентрацию лютеинизироующего гормона в сыворотке крови суки, и как только та достигнет пикового значения, проводите вязку в течение 3-5 дней.

Клиническое обследование
Полное тщательное клиническое обследование кобеля необходимо по двум важным причинам. Первая заключается в возможности наличия у собаки системного заболевания, а также проведения ей соответствующего медикаментозного лечения - оба фактора могут негативно влиять на плодовитость кобеля (Таблица 4).

Таблица 4. Некоторые лекарственные препараты, оказывающие нежелательное влияние на функцию воспроизводства собак

1. Либидо и качество спермы
* Циметидин
* Гормоны (глюкокортикоидные, эстрогены, андрогены, анаболические стероиды, прогестины)
* Кетоконазол
* Спиронолактон
* Антихолинэргические средства
* Пропанолол
* Дигоксин
* Нейролептики (хлорпромазин, барбитураты, диазепам)
* Тиазидные диуретики
2. Качество спермы
* Амфотерицин В
* Многие противоопухолевые препараты

Вторая причина связана с вероятностью обнаружения у кобеля таких наследственных заболеваний, при которых животное не допускается к племенному разведению; их диагностика исключает необходимость проведения дальнейшей оценки плодовитости кобеля. Когда на основании данных анамнеза возникает подозрение об отсутствии у него нормального либидо или способности к спариванию, возникает необходимость в дополнительном обследовании кобеля на предмет наличия у него заболеваний скелетно-мышечной или нервной систем, к которым предрасположены собаки его породы.
Затем тщательно обследуют органы размножения. Исследуют препуций и кожу мошонки, тщательно пальпируют содержимое мошонки. Определяют, имеют ли тестикулы, их придатки и семенные канатики нормальную локализацию, величину, форму, консистенцию, а также не испытывает ли кобель дискомфорт, связанный с какими-либо отклонениями половых органов. Тестикулы и их придатки должны быть гладкими. Обычно хвост придатка слегка более твердый, чем тестикулы. Придатки легко отличить от тестикулов, особенно если пропальпировать их вдоль хвоста. Если тестикулы и их придатки невозможно дифференцировать пальпацией, то это означает, что те или другие отличаются от нормы. В размягченных и уменьшенных тестикулах может не происходить нормального сперматогенеза. Следует определить ширину каждого тестикула и общую ширину мошонки. С этой целью тестикулы бережно сдвигают на дно мошонки и измеряют их ширину с каудальной стороны. Затем тестикулы вытягивают "вдоль сагиттальной оси и промеряют общую ширину мошонки. Результаты этих измерений полезны для контроля течения (прогресса или прекращения) болезни. Причинами чрезмерного уменьшения размера тестикулов могут быть их врожденная гипоплазия, дегенерация и атрофия. Как следствие, прогноз на восстановление плодовитости у кобелей, имеющих очень маленькие тестикулы, неблагоприятен. Исключение составляет атрофия тестикулов, которая возникла в результате угнетения гормональной оси гипоталамус - гипофиз - гонады, вызванного чрезмерным образованием эстрогена или другими гормональными нарушениями. Опухоли тестикулов, имеющие достаточно большую величину, легко обнаружить при пальпации. Они обычно неровные и имеют не такую консистенцию, как окружающая паренхима. При одностороннем поражении тестикулов, например, при орхите или опухолях, показана односторонняя кастрация, позволяющая защитить нормальный тестикул от повреждения вследствие перегрева, сдавливания, растяжения и гормонального воздействия со стороны пораженного тестикула.
Если данные анамнеза указывают на возможность наличия у кобеля нарушения со стороны полового члена, последний необходимо обследовать перед тем, как будет предпринята попытка взять пробу спермы. Альтернативно пенис можно обследовать во время сбора спермы. Предстательную железу лучше всего пальпировать трансректально или трансабдоминально одновременно двумя руками. В отличие от гладких тестикулов, поверхность предстательной железы слегка уплотнена. Предстательная железа состоит из 2 симметричных долей. Пальпация не должна быть болезненной.


Дополнительные диагностические исследования
Скрытый текст

Собак, находившихся в эндемичных по бруцеллезу районах, необходимо исследовать на инфекцию Brucella canis, что является рутинной составной частью оценки плодовитости, даже если ранее проведенные тесты дали отрицательный результат. Особенно важно проведение такого исследования, если, по данным анамнеза, в питомнике, где содержится кобель, регистрировали гибель эмбрионов или аборты, или если кобель подвергался реальному риску заражения бруцеллами (5). Вследствие коварного характера инфекции В. canis и расширения международных перевозок спермы собак возможен ее непредвиденный занос в питомники даже тех стран, которые считаются благополучными по ней. Если у кобеля диагностировали бруцеллез, то необходимости в дальнейшем обследовании его репродуктивной функции нет, но для сохранения за питомником статуса племенного целесообразно проведение эпизоотологического исследования. Необходимо установить причину нарушений, выявленных при клиническом обследовании. Количество форменных элементов крови, биохимические параметры сыворотки крови и результаты анализа мочи позволяют оценить общее состояние здоровья собаки. Однако при отсутствии клинических нарушений или явных признаков болезни мало шансов установить причину бесплодия. Обычно рекомендуют проведение скрининга кобелей, проявляющих бесплодие, на гипотиреоидизм. Между тем при экспериментально индуцированном гипотиреоидизме либидо, величина тестикулов, образование спермы и ее качество, а также концентрация тестостерона и лютеинизирущего гормона в сыворотке крови взрослых кобелей не претерпевают изменений (6). УЗИ - прекрасный метод дальнейшего изучения любых отклонений от нормы, выявленных при пальпации мошонки, семенного канатика, тестикулов и их придатков. Этот метод дает значительно более ценную в диагностическом плане информацию о состоянии предстательной железы, чем пальпация (7). Заболевания предстательной железы часто становятся причиной бесплодия. С помощью проводимой под контролем УЗИ аспирации через тонкую иглу проб тестикулов и предстательной железы из пораженных участков этих органов можно легко получить пригодный для исследования материал. Пробы полученных этим методом тканей подвергают цитологическому и бактериологическому исследованиям. При отсутствии клинических или поведенческих объяснений слабого либидо проводят наблюдения за кобелем в спокойных условиях и в присутствии суки, находящейся в течке. Если тот по-прежнему не проявляет активного либидо или у него не возникает эрекции, то проводят оценку секреции у него тестостерона. Максимальная концентрация тестостерона у нормальных кобелей бывает ниже уровня чувствительности некоторых тестов, применяемых для ее определения. Поэтому необходимо определять концентрацию тестостерона в сыворотке крови кобеля до и после введения гонадотропин-рилизинг гормона или хорионического гонадотропина человека. Недостаточное образование тестостерона редко выявляют у бесплодных кобелей, которые по остальным критериям не имеют отклонений от нормы.

Оценка качества спермы
В конечном счете, самой главной, если не единственной детерминантой плодовитости самца служит качество его спермы. Снижение либидо и способности к спариванию можно преодолеть специальными репродуктивными методами, например, с помощью электроэякуляции и искусственного осеменения. Остается только обсудить подходы к диагностике и лечению бесплодия у кобелей, которые обладают всеми остальными необходимыми для воспроизводства данными, но не могут дать потомство даже при правильной организации проведения вязки с плодовитыми суками, находящимися в течке. От них необходимо взять пробы спермы для цитологического и бактериологического анализов (1,8). Основные параметры, которые определяют при цитологическом исследовании, - число сперматозоидов, их морфология и подвижность, присутствие в эякуляте других клеток. По этим параметрам качество спермы оценивают как нормальное, а также определяют олигозооспермию, азооспермию, тератозооспермию, астенозооспермию, лейкоспермию и гемоспермию (Таблица 5).

Таблица 5. Параметры спермы кобеля

Норма Отклонение от нормы
Объем 2.5- > 80 мл
Цвет Непрозрачная Прозрачная, желтая, красная
Общее число сперматозоидов в эякуляте 300-2,000 х 10 (6) <200х 10(6) олигозооспермия
% активных сперматозоидов > 70 % <50% астенозооспермия
% сперматозоидов с нормальной морфологией > 80 % < 70% тератозооспермия
рН 6.3-6.7
Количество лейкоцитов в поле зрения микроскопа при большом увеличении <6 > 7-10

Здоровая сперма
Кобель здоров. В этом случае осуществляют первичную проверку его племенных качеств. По меньшей мере, дважды осеменяют его спермой суку в оптимальный для оплодотворения период, который определяют по времени овуляции. Если в прошлом у кобеля брали сперму для искусственного осеменения, то следует убедиться в том, что при этом не происходит повреждения половых клеток при их сборе и проведении осеменения (Таблица 6).

Таблица 6. Факторы, негативно влияющие на качество спермы

* Вода
* Смазка
* Пластик
* Латекс
* Холод
* Тепло
* Моча

Оплодотворяющую способность замороженной спермы лучше подтвердить введением ее в матку суки, а не во влагалище. На качество охлажденной или замороженной спермы влияют состав среды, метод разведения (одно- или двухэтапный), конечная концентрация сперматозоидов, температура и скорость охлаждения, замораживания и оттаивания, температура хранения (9-14). Таким образом, здоровые сперматозоиды могут быть повреждены на разных этапах сбора, охлаждения, заморозки, хранения, транспортировки, нагревания и оттаивания спермы, а также при проведении осеменения ею суки.
Второй этап проверки племенных качеств кобеля, сперма которого прошла специальный лабораторный тест, предусматривает осеменение его спермой различных сук, причем относительно хотя бы одной из них должны иметься достоверные данные о ее плодовитости.
Третий этап проверки основан на предположении, что кобель перестал быть бесплодным. Если во время хотя бы одной из проверок эякулят не соответствовал нормативным показателям, проводят повторное тестирование. В случае, когда вновь подтверждается низкое качество спермы, часть ее сохраняют или отсылают в лабораторию для бактериологического анализа, переходя к дальнейшим исследованиям.


Тератозооспермия и астенозооспермия
Скрытый текст

У сперматозоидов с нарушенной морфологией обычно снижена подвижность. Изменения их морфологии и подвижности могут быть ятрогенными, возникать в результате холодового или теплового шока, сдвигов рН и осмомолярности. Поэтому мы комплексно обсудим эти параметры. Нормальные сперматозоиды совершают быстрые, равномерные движения, которые способствуют их продвижению. Ятрогенные причины наиболее часто уменьшают подвижность морфологически нормальных сперматозоидов. Однако снижение подвижности половых клеток служит также одним из ранних признаков повреждения тестикулов. К тератозооспермии и астенозооспермии склонны половозрелые и стареющие кобели. Количество измененных сперматозоидов может возрастать, а их подвижность снижается в процессе полового воздержания вследствие обычного старения резервных сперматозоидов, находящихся вне тестикулов. Если эякулят собран лишь в небольшом объеме (1 мл или менее), не следует делать поспешные выводы. Вместо этого надо повторно взять пробу спермы от собаки. Снижение скорости движений здоровых по другим параметрам сперматозоидов обычно служит признаком переохлаждения. Для проверки этой гипотезы микроскопируют часть повторно взятой пробы спермы, помещенной на теплое (37°С) предметное стекло, - здоровые сперматозоиды проявят присущую им подвижность. Норме соответствует прямолинейное и поступательное движение сперматозоидов, и если они двигаются как-то иначе (в сторону хвоста, кругами и тд.), это обычно обусловлено морфологическими дефектами их срединной части или хвоста.

Классификация морфологических изменений сперматозоидов основана на их локализации в головке, срединной части и хвосте последних. Неправильно подобранные рН или осмомолярность краски может вызвать нарушение морфологии половых клеток. В случаях, когда активность сперматозоидов соответствует норме, но их хвост слишком длинен, а срединная часть изменена, следует предполагать, что это вызвано ятрогенной причиной, например, уже упомянутой краской (15) (Рисунки 1 и 2).

Рисунок 1. Здоровая сперма кобеля. Окраска красителем Общества териогенологии, осмамолярностъ 189 мОсм


Рисунок 2. Загиб хвостов сперматозоидов, вызванный красителем. Та же проба спермы, что и на Рисунке 1, окрашенная красителем Общества териогенологии, осмомолярность 137 мOcм


Любая травма тестикулов может привести к тератозооспермии. Выздоровление в таких ситуациях возможно, если сперматогонии не повреждаются необратимо. Практически в любом эякуляте обычно присутствуют сперматозоиды с морфологическими показателями, отличающимися от нормы. Основываясь на наблюдениях, сделанных при исследованиях спермы быков, обнаружение в сперме кобелей преобладания какого-либо одного морфологического изменения в сперме обычно указывает на генетическое (наследственное), а не приобретенное нарушение, особенно если такое изменение имеют >25% сперматозоидов в исследованных на протяжении продолжительного периода пробах спермы (16). Две такие генетические аномалии, как дефект «Dag» (Рисунок 3) и «обрубленный хвост», описаны у сперматозоидов собак.


Рисунок 3. Дефект «Dag» у находящегося в центре сперматозоида (фазово-контрастная микроскопия). Фотография любезно предоставлена д-ром Патрицией Олсон (Morris Animal Foundation, Hnglewood Colorado USA).


Олигозооспермия и азооспермия
Скрытый текст

Количество образуемых сперматозоидов непосредственно зависит от величины тестикулов. Хотя прогноз при олигозооспермии значительно лучше, чем при полном отсутствии сперматозоидов, начальные этапы диагностики этих нарушений не различаются. Неполовозрелые и стареющие собаки предрасположены к олиго- и азооспермии. У здоровых кобелей при ежедневной эякуляции количество сперматозоидов в каждом эякуляте снижается вследствие истощения резервных половых клеток, находящихся вне тестикулов - в придатках тестикулов и семяпроводе (6,8). Если у кобеля за день произошло две эякуляции, во втором эякуляте окажется немного сперматозоидов. Чтобы их количество в сперме было на максимально высоком уровне, необходимо, чтобы между эякуляциями проходило 3-4 дня. При олигозооспермии резерв сперматозоидов может восполняться не столь быстро, как у здоровых кобелей. Однако здоровые сперматозоиды даже в небольшом количестве способны вызвать беременность. Вероятность этого возрастает, если осеменение проводится в оптимальный для оплодотворения период - во время овуляции. Ряд исследователей полагает, что маточное осеменение успешнее влагалищного, а вязка во всех отношениях предпочтительнее влагалищного искусственного осеменения. Снижение объема эякулята почти всегда обусловлено плохой техникой сбора. Однако бывают случаи, когда его причинами становятся ретроградная эякуляция и болезни предстательной железы. Уменьшение объема эякулята может вызвать снижение в нем общего количества сперматозоидов. В норме некоторые сперматозоиды ретроградно перемещаются в мочевой пузырь. Пока не установлено, какие причины заставляют большое количество сперматозоидов осуществлять такую миграцию, но, конечно, следует полагать, что больше половых клеток двигается антероградно через уретру, чем ретроградно в мочевой пузырь. Ретроградную эякуляцию сперматозоидов подтверждают обнаружением их в моче - до и после эякуляции. Рекомендуется лечение а-адренэргическими средствами, которые повышают давление сфинктера уретры (8). У кобелей с таким нарушением, как упоминалось выше, необходимо исключить заболевания предстательной железы. Азооспермия может быть результатом нарушений образования сперматозоидов, эякуляции и сбора фракции эякулята, богатой половыми клетками. Чтобы исключить возможность последнего или прерванной эякуляции, следует определять активность щелочной фосфатазы в полученных пробах спермы. Щелочная фосфатаза образуется в придатках тестикулов. Надо ожидать, что жидкость, выходящая из придатков тестикулов, содержит сперматозоиды и щелочную фосфатазу в высокой концентрации (обычно > 5000 МЕ/л). Азооспермия, сопровождающаяся высокой активностью щелочной фосфатазы спермы, указывает на недостаточность сперматогенеза или двустороннюю непроходимость семявыносящих протоков, препятствующих прохождению сперматозоидов из тестикулов в их придатки. Нарушения образования сперматозоидов имеют врожденный и приобретенный характер. Для постановки окончательного диагноза может потребоваться биопсия тестикулов. Однако предварительно следует провести исследования. Для исключения врожденных нарушений оценивают состояние гипоталамо-гипофизарногонадной гормональной оси; также может быть проведено кариотипирование. Концентрация щелочной фосфатазы в азооспермийных пробах бывает пониженной по ряду причин. Одна из них обусловлена сбором только первой фракции эякулята (преспермы), которая образуется в предстательной железе. В ряде случаев процесс эякуляции остается незавершенным. Еще одна причина связана с двусторонней непроходимостью семявыносящих протоков, препятствующей прохождению сперматозоидов в придатки тестикулов. Следует также исключить заболевания предстательной железы, так как оба семяпровода проходят через предстательную железу и открываются в предстательном отделе уретры.

Гемоспермия
Скрытый текст

В большинстве случаев кровь попадает в сперму из предстательной железы или с поверхности пениса при сборе эякулята. Последнюю возможность можно быстро исключить осмотром полового члена, который проводят сразу же после обнаружения крови. Как правило, при травмировании пениса во время сбора эякулята кровь имеет ярко-красный цвет. Кровь, попавшая в сперму из предстательной железы, обычно красновато-коричневая. Такое изменение цвета отмечают во всех фракциях эякулята. Допускается, что в отдельных случаях гемоспермию вызывают поражения препуция, уретры, мочевого пузыря, тестикулов.

Лейкоспермия
Скрытый текст

Лейкоциты обычно присутствуют в сперме кобелей. Чаще всего они попадают в нее с препуция. Сообщалось о том, что в норме концентрация лейкоцитов в эякуляте не превышает 2000 клеток/мкл или 6 лейкоцитов в одном поле при проведении световой микроскопии проб эякулята, полученных центрифужным методом, при большом увеличеиии (1,8). Другие воспалительные клетки, например, макрофаги, также могут присутствовать в сперме. В каждом случае воспаления пробы спермы следует подвергать бактериологическому исследованию на наличие аэробных и анаэробных бактерий, а также микоплазм (18). С учетом вероятности контаминации спермы микроорганизмами, попадающими в нее с препуция и из мочевого тракта, клинически значимым считают титр аэробных бактерий >10 000 колониеобразующих единиц/мл (8,18). Хотя вероятность столь интенсивной бактериальной контаминации выше в пробах спермы, содержащих большое количество воспалительных клеток, ее регистрируют и у многих собак, в эякуляте которых нет воспалительных клеток. Поэтому высев проб спермы на питательные среды должен быть неотъемлемой частью диагностики независимо от наличия или отсутствия воспалительных клеток в тестируемом материале (18).

Дополнительная информация
Цикл сперматогенеза у кобелей приблизительно равен 62 дням. Изменения качества спермы обычно не проявляются за более короткое время, независимо от того, были ли их первичной причиной ятрогенные факторы или технические погрешности, допущенные при сборе спермы. Установление причин повреждения тестикулов и подтверждения наличия жизнеспособных сперматогониев открывает возможность улучшения или восстановления плодовитости кобелей. Если кобель во всех остальных отношениях здоров, имеет тестикулы нормальной величины и консистенции, рекомендуется повторно проводить оценку качества его спермы через 3,6 и 12 месяцев после первичного тестирования (17). При отсутствии изменений качества спермы в течение 12-месячного периода маловероятно, что те когда-нибудь вновь проявятся.